幽门螺杆菌感染与PCNA、TGF-betal表达的关系

山东医药 2000年第24期第40卷 临床研究

作者：周世庆　张伯新　赵东　徐向阳

单位：周世庆(济南市中心医院　山东济南　250013)；张伯新(济南市中心医院　山东济南　250013)；赵东(济南市中心医院　山东济南　250013)；徐向阳(山东省胸科医院)

　　幽门螺杆菌(HP)感染是导致胃癌发生的重要原因之一，但HP并非胃癌的直接致癌物，而是通过对胃粘膜的损伤，促进病变发展的条件因素，使胃癌发生的危险性增高。我们通过研究HP感染与胃粘膜PCNA、TGF－betal表达的关系，探讨HP可能致癌机理。

　　1　资料与方法

　　1.1　临床资料　选自我院1999年2月～2000年6月门诊和住院患者110例的胃粘膜活检标本。其中慢性浅表性胃炎(CSG)20例，慢性萎缩性胃炎(CAG)30例，不典型增生(DYS)30例和胃癌(GCA)30例。每例取新鲜胃粘膜5块(胃窦及病灶部)，其中一块立即行尿素酶试验，另外4块胃粘膜用中性福尔马林液固定，常规石蜡包埋，HE染色进行病理诊断。

　　1.2　方法　①HP感染的判断：尿素酶试验及改良Giemsa法两者均阳性为HP感染阳性，两者均阴性为HP阴性。②免疫组化SABC法：抗PCNA单克隆抗体及抗TGF-betal抗体由武汉博德公司提供，用TBS替代第一抗体作为空白对照。

　　1.3　结果判定　PCNA为颗粒型阳性，定位于细胞核呈棕黄色，数3个以上高倍镜视野不小于500个细胞，计算阳性细胞，计算PCNA指数(PCNA LI)。TGF-betal阳性染色定位于细胞膜及细胞浆中，核不着色。其结果判断按Shimizu法，先在高倍镜下对细胞内反应作如下评分：①阳性着色程度：无着色为0，浅着色为1，深着色为2。②阳性着色范围：无着色为0，着色小于1／3为1，着色大于1／3为2，弥漫着色为3，两者相加大于3为阳性。

　　1.4　统计学方法　PCNA LI两样本均数的比较用t检验，HP感染率及TGF-betal的免疫组化检测采用卡方检验。

　　2　结果

　　各组之间以DYS的HP感染率为最高76.67％，CSG为45％，两者比较有显著性差异(P＜0.05)。30例胃癌中，有明确的淋巴结转移的患者17例，其TGF-betal阳性率为95.68％，其余13例未发现转移的胃癌患者TGF-betal的阳性率为72.57％，两者比较P＜0.05。同一类型胃粘膜HP阳性组PCNA、TGF-betal的表达均高于HP阴性组，P值均小于0.05，TGF-betal在胃癌组的表达均高于其它各组，见表1。

　　表1　HP感染与PCNA LI、TGF-betal

　　表达的关系(±s，％)

　　3　讨论

　　3.1　PCNA是一种分子量为36KD的酸性核蛋白，是DNA合成时聚合酶δ的辅酶，是细胞增殖周期中DNA合成的必要蛋白^［1］。有资料表明^［2］：HP可加速胃粘膜细胞的复制。其引起胃粘膜细胞增殖的可能机制是：HP产生大量尿素酶，分解尿素后产生的氨可直接刺激细胞增殖。HP也可刺激局部胃上皮细胞分泌许多细胞因子，如IL-1，IL-6，IL-8和TNF，都可以促进细胞增殖。本研究显示：PCNA IL在HP(＋)，组较(－)组明显增高(P＜0.01)，表明HP感染促进了细胞增殖，使胃粘膜处于高增殖状态，从而增加了细胞DNA的损伤^［3］。这可能是HP感染引起胃癌发生的机制之一。同时本研究亦显示，不典型增生HP感染时较慢性浅表性胃炎的PCNA量也明显增高(P＜0.01)，同胃癌的增殖程度相接近(P＞0.05)，而无HP感染的DYS与GCA有明显差异(P＜0.01)。故我们认为，对DYS伴有HP感染者应定期行胃镜活检，必要时行PCNA检查，应进行根除HP的抗菌治疗。

　　3.2　TGF-betal是参与细胞生长周期调控的重要因子之一，在肿瘤的增殖及凋亡过程中有重要作用。Yamamoto等^［4］报道，TGF-betal能诱导GCA细胞的凋亡。TGF-betal通过TGF受体起作用，同时TGF-betal还能促进胃癌的淋巴结转移。本研究显示，HP(＋)组TGF-betal的表达明显高于HP(－)组(P＜0.05)，而CSG、CAG及DYS之间无明显差异(P＞0.05)。有无淋巴结转移的GCA患者其TGF-betal阳性率有明显差异。表明HP感染加速了胃癌患者细胞的凋亡，TGF-betal在胃炎及癌前病变中作用不明显。所以HP感染可以通过TGF-betal的高表达致肿瘤的增殖与凋亡失衡，促进肿瘤细胞的转移。

　　参考文献

　　1，Fairman NP.DNA Polymerase PCNA actions and interactions.J Pathol，1990，137：313～330.

　　2，BrenesF，Ruiz B，Correa P，Hunter F，et al.Helicobacter pylori causes hyper-preliferating of the gastric epithelium；pre and post eradication induces of proliferating cell nuclear antigen.AmJ Gastroenterol，1993，88：1870～1872.

　　3，Hall PA，Levison DA，Woods AL et al.Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)immunolocalization in paraffin section.Cell proliferation with evidence of deregulated express in some neoplasms.J Pathol，1990，(4)：285～294

　　4，YamamotoM，Maehara，et al.Transforming gronth facter betal induces apoptosis is in gastric cancer Cells through a P⁵³-inpendent pathway.Cancer，1996，77(8suppl)：1628～1633.

(收稿日期：2000-10-16)